本发明公开了一种检测人血清中的前列腺特异性抗原的生物传感器及其制备方法和应用，属于生物传感器领域。上述制备方法包括：步骤1：合成金纳米棒，并利用DNA对金纳米棒功能化；步骤2：在电极表面电沉积PEG/PEDOT纳米复合材料，再其上固定链霉亲和素以及生物素标记的多肽；步骤3：将DNA功能化的金纳米棒通过Au‑S键固定到电极上，并用亚甲基蓝分子吸附在DNA上形成信号放大器，得到生物传感器。该生物传感器最低检测限为0.035pg/mL，线性范围为0.10pg/mL至10.0ng/mL，并且由于防污多肽的存在，能够检测真实人血清中的前列腺特异性抗原，表明所构建的生物传感器具有很大的实际应用潜力。