本发明公开了一种Grx‑roGFP/Gpx3‑roGFP基因过表达16HBE单克隆细胞系模型构建方法，其构建方法步骤如下：步骤一：首先将目的基因Grx‑roGFP和Gpx‑roGFP克隆至慢病毒载体pLV‑puro上；步骤二：进一步用慢病毒载体pLV‑W包装成慢病毒后感染16HBE细胞，并通过puromycin筛选Grx‑roGFP和Gpx‑roGFP基因过表达稳定细胞株，从而构建了可实时动态观察支气管上皮细胞线粒体内氧化还原动态的细胞系，将可特异性检测GSH的谷氧还蛋白(Glutaredoxin，Grx)与特异性检测H2O2的谷胱甘肽过氧化酶Gpx3和roGFP融合，通过观测Grx‑roGFP及GPX3‑roGFP可实时动态检测细胞内谷胱甘肽和H2O2，从而推测细胞体内氧化还原状态的变化，揭示活性氧的致病机理，为研究细菌、病毒感染，烟草暴露，以及一些工作场所的灰尘和烟雾、天气和空气质量引起的肺部病变提供了原位模型。