本发明公开了一种基于二茂铁和金丝桃素的复合纳米材料、制备方法及应用。所述制备方法为在四氢呋喃介质中加入聚乙二醇聚赖氨酸、二茂铁甲酸N‑琥珀酰亚胺酯和金丝桃素，产物自组装形成所述基于二茂铁和金丝桃素复合纳米材料。本发明制备基于二茂铁和金丝桃素的复合纳米材料，具有局部浓度高、抗肿瘤疗效好、肾清除迅速、生物兼容性高和毒副作用小等优点。本发明抗肿瘤疗效佳体现在：产生大量活性氧并耗竭肿瘤局部的谷胱甘肽，铁死亡和金丝桃素介导的光动力治疗产生协同作用，同时触发免疫原性细胞死亡，实现强大的抗肿瘤效果。