本发明公开了一种环糊精/金纳米粒子功能化的棉织物Cot@AuNPs@β‑CD及其制备方法和应用，属于功能复合材料和分离、鉴定技术领域。本发明首先在棉织物表面原位生成AuNPs；然后在磷酸二氢钾催化作用下，使多元羧酸与环糊精发生酯化交联反应生成具有网状结构的多元羧酸交联β‑CD聚合物，再对棉织物进行焙烘固化整理即可。本发明借助棉织物结构的高化学活性，在棉织物表面原位组装金纳米粒子和β‑环糊精，通过棉织物纤维毛细作用和环糊精修饰后静电和主客体相互作用实现混合染料的分离，而贵金属纳米涂层又能增强分离组分的拉曼信号，实现了在棉织物表面的层析分离和一体化的SERS鉴定。