本发明涉及一种基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法，具体包括以下步骤：S1：制备荧光标记物，使用制备的荧光标记物标记抗体；S2：将抗体包被至固相载体中，并进行封闭；S3：将待检抗原加入所述步骤S2的固相载体中，使抗原与抗体相结合，形成抗原抗体复合物；S4：向所述步骤S3的固相载体中加入所述步骤S1中已荧光标记的抗体，进行孵育后，放入时间分辨免疫荧光分析仪进行检测，筛选抗体。该基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法提高了抗体筛选配对成功率，减轻了工作量，具有高通量筛选抗体配对的优点，同时提高了与POCT免疫层析技术平台抗体配对符合率。