本实用新型涉及一种穿刺针定位夹具及穿刺导航设备，包括握持件和夹持件；握持件具有一端开口的容置槽，容置槽用于限位穿刺针；夹持件可拆卸地套设于握持件设有容置槽的一端，夹持件开设有用于夹持所述穿刺针的限位孔；夹持件能够相对于所述握持件旋转以在锁紧状态和解锁状态之间切换，使得上述穿刺针定位夹具兼顾了穿刺针定位夹具与穿刺针之间固定紧密且拆装方便的特点，同时不影响原有穿刺手术效率，可以适配不同型号的穿刺针，进而提升穿刺针定位夹具与手术导航系统的普适性，为多种超声引导下的穿刺针介入操作提供高精度导航，从而提高手术的准确度与效率，促进精准医疗的普及。