本发明公开了一种提高压载挑战水盐度的方法，包括采集天然半咸水，检测其包括盐度、pH、溶解氧和溶解性有机碳的水化参数和生物数量，生物数量包括≥50μm生物和10–50μm生物数量，根据天然半咸水的体积添加营养盐为生物提供营养，根据天然半咸水的盐度和体积计算盐度升高3.5PSU所需的盐卤添加量，根据计算结果分批次添加盐卤，检测添加盐卤后水体的水化参数和生物数量。本发明通过添加营养盐和分批添加盐卤相结合制备具有满足公约要求的生物密度的高盐度压载挑战水，克服现有的提高压载挑战水盐度过程中盐度骤然增加对水体生物造成的不良影响和成本高的问题。