本发明公开了一种5α,6α‑环氧‑11β,17α‑二羟基孕甾‑3,20‑二乙二醇缩酮的制备方法，以缓冲液或者纯水作为反应体系，加入底物6‑甲基还原物、氧供体以及氧载体，使用脂肪酶进行生物催化合成反应；反应结束后，将反应物分离、纯化得到产物6‑甲基环氧化合物即为5α,6α‑环氧‑11β,17α‑二羟基孕甾‑3,20‑二乙二醇缩酮，反应式如下本发明使用酶法生物催化合成6‑甲基环氧化合物，可以避免化学合成对环境带来的不利影响，且酶法可原位合成用于环氧反应的过氧酸，可避免化学合成过程中双氧水添加存在的风险。