本发明涉及一种水稻叶片表皮毛观察的方法，包括如下步骤：步骤（1）、选择水稻植物材料的剑叶中部用锋利的刀片切下，将剑叶的叶片切下的放入装有预冷的2.5%戊二醛固定液的EP管中固定过夜，得到叶片样品；步骤（2）、准备50%、70%、85%、95%、100%的乙醇溶液，将叶片样品置于离心管，依次用50%、70%、85%、95%的乙醇溶液分别脱水30 min，最后用100%乙醇脱水3次；步骤（3）、将干燥好的叶片样品黏贴于载物台上，然后进行喷金处理；步骤（4）、将叶片样品放入扫描电镜中，进行观察及拍照；步骤（5）、叶表面毛状体密度等于一定面积内的毛状体个数除以该面积。通过本发明，方法简便，便于科学研究与实际生产，效率高，重复性好，准确度高。