本发明公开了用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针及其制备方法，属于荧光探针技术领域。本发明的荧光探针由两亲性共聚物为外壳包裹有机染料分子构成，所述的有机染料分子包括香豆素衍生物和1,8‑萘酰亚胺衍生物，所述的香豆素衍生物为香豆素苯并噻唑衍生物或香豆素吡啶盐衍生物。该探针利用肟基作为识别位点，与ClO^‑发生氧化反应，形成羰基，释放出前体荧光信号，制备得到的比率型荧光探针具有良好的灵敏性、特异的选择性及超快的响应速度，在较宽的pH范围内稳定且不受其它相关离子的干扰，是一种检测次氯酸的良好荧光分子探针，可应用于活细胞中外源性/内源性的ClO^‑荧光成像检测。