融合酶的制备方法及融合酶
实质审查的生效
摘要
本发明提供了一种融合酶的制备方法及融合酶，本发明的融合酶的制备方法首先构建融合酶质粒，之后提取融合酶质粒，并将其转入到毕赤酵母中，进行发酵表达；再利用毕赤酵母制备粗酶液，并进行融合酶的分离纯化。在非特异性过氧化酶(UPO)的突变体JaWa、SoLo、WamPa的C端融合6×His‑SUMO标签，以及融合酶在毕赤酵母中的诱导表达及其后期的分离纯化，JaWa可去除酶的过氧化活性，WamPa本身在有机溶剂中具有良好的稳定性，而SUMO标签能可有效提高酶的表达量，使之高效的催化反应。此外，将JaWa、SoLo、WamPa融合6×His‑SUMO标签后能够利用组氨酸与金属离子Ni2+的螯合作用进行分离纯化，分离纯化后的酶催化活性大大提高。
基本信息
专利标题 ：
融合酶的制备方法及融合酶
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114480472A
申请号 ：
CN202210081967.1
公开（公告）日 ：
2022-05-13
申请日 ：
2022-01-24
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
高静李彦洁姜艳军周丽亚
申请人 ：
河北工业大学
申请人地址 ：
天津市红桥区光荣道8号河北工业大学东院
代理机构 ：
石家庄旭昌知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人 ：
张会强
优先权 ：
CN202210081967.1
主分类号 ：
C12N15/81
IPC分类号 ：
C12N15/81 C12N9/08 C07K19/00 C12R1/84
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体或其分离、制备或纯化；所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/63
使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节
C12N15/79
专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统
C12N15/80
用于真菌
C12N15/81
用于酵母
法律状态
2022-05-31 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 15/81
申请日 : 20220124
申请日 : 20220124
2022-05-13 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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