本发明涉及一种地黄中梓醇含量的测定方法，所述测定方法包括如下步骤：提供包含梓醇对照品的对照品溶液，制备地黄样品的供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，测定所述地黄样品中的梓醇含量。本发明通过对高效液相色谱条件进行整体优化，包括固定相选择以及供试品洗脱方式的调整，有效缩短供试品溶液检测分析耗时，降低地黄质量检测的时长，整体提升质量检测效率、避免含地黄产品投产延期、提高生产效率。并且，发明人还发现，采用本发明的测定方法，能避免检测上一针对下一针的检测的干扰，同时梓醇色谱峰分度高。