本发明公开了一种定植杯自动摆杯装置及定植杯夹具，包括输送机，输送机的机架上通过支撑立柱设置有固定支架，输送机的输送带从固定支架下方穿过，固定支架上设置有能前后滑动和上下移动的定植杯卸落机构，定植杯卸落机构上设置能将位于定植杯卸落机构最下方的定植杯夹紧和松开的定植杯夹具，输送机机架的左右两侧分别设置有用于从两侧将育苗穴盘夹持并带动其上下移动的育苗穴盘夹具，输送机的出料端左右相对设置有用于将育苗穴盘拦截在定植杯夹具下方的拦截机构。本发明能代替人工将码垛层叠的定植杯一一分离摆放在育苗穴盘中，有效提高定植杯的摆杯效率，降低工作人数和工人的劳动强度，进行定值杯分离的同时还能去除定植杯上的飞边毛刺。