本发明公开了一种Aβ响应的光激活荧光探针及其制备方法和应用，该探针结构式如下式Ⅰ所示。本发明的探针是具有光激活功能的探针监测Aβ，以邻硝基苄醇为光响应基团。本发明的探针制备简单，使用方便，从响应前后的荧光强度变化可以快速检测Aβ，实现快速检测的目的。该探针的特点在于本身无荧光不能与Aβ结合，但在光激活下可与Aβ迅速结合，产生明显的荧光信号增强，从而实现对Aβ选择性快速检测。因此，本发明中的探针可以作为一个有效的工具来检测阿兹海默症中的生物标记物Aβ，可以为设计Aβ响应探针提供思路，具有早期诊断阿兹海默症的潜力。