本发明提供了一种干细胞衍生品及其制备方法和应用。其制备方法包括如下步骤：步骤S1:在3～10％氧浓度的环境下，将脐带或胎盘制备成组织块，将所述组织块在第一培养基中进行培养，当贴壁细胞的融合度为30％～90％时，进行细胞消化传代，将消化传代后的细胞传到第4至6代时，将细胞继续接种于第二培养基中继续培养48～72h后，离心得到第一上清液和沉淀。步骤S2：将沉淀用生理盐水重悬，将细胞破碎离心得到第二上清液；步骤S3：将第一上清液和第二上清液合在一起经过除菌过滤，再超滤得到干细胞衍生品。本发明的方法能够获得大量的干细胞衍生品。