本发明公开了一种用于预防和治疗高原肺水肿的间充质干细胞杂化胞外囊泡的制备方法，包括提取间充质干细胞可溶性因子与胞外囊泡混合物，分离可溶性因子与胞外囊泡；浓缩可溶性因子；制备包载可溶性因子的脂质体；将包载间可溶性因子的脂质体与天然胞外囊泡进行膜融合，得到杂化胞外囊泡。本发明研究发现杂化囊泡保留了天然囊泡表面的特征抗原，并且同体积培养基中得到的蛋白和核酸量为天然囊泡的100倍左右，显著提高了对间充质干细胞分泌的活性组分的利用效率，部分解决了天然囊泡产率低、成产成本高的问题。同时，杂化囊泡具有与天然囊泡相似的高原肺水肿干预效果，可用于预防和治疗其发生发展，具有良好的临床应用价值。