本发明公开了糖基化位点阻断/蛋白固定化磁性纳米颗粒，所述磁性纳米颗粒以四氧化三铁磁球为载体，在载体表面包裹一层二氧化硅，进一步修饰氨基和醛基，接着在醛基上连接抗原并用牛血清白蛋白对活性位点进行封闭，最后加入抗原的糖基化位点遮蔽剂进行阻断制备而成。所述磁性纳米颗粒可以实现抗体的特异性捕获或分离。本发明联合应用磁性纳米颗粒和以氧化石墨烯为载体的荧光信号放大器，不仅对抗体的检测灵敏度高，检测范围广，并且与酶联免疫吸附测定技术相比具有耗时短、制备简单、价格便宜、储存运输条件简单和稳定性好等优点。