本发明公开了一种提高金针菇液体菌种活性的方法。包括以下步骤：制备粉末状培养基，并以粉末状培养基制备金针菇固体菌种；将制备得到的金针菇固体菌种无菌条件下，用无菌玻璃棒将固体菌种捣碎，成为粉末状固体菌种，接入种子罐中并培养；将发酵培养液1000L倒入1300L的发酵罐中116℃灭菌45分钟，接着再冷却至25℃，将种子罐菌种以10％的接种量接种于发酵罐中，并在无菌环境下持续通气。本发明提供一种提高金针菇液体菌种活性的方法，通过对金针菇液体菌种以发酵培育和种子罐培育的方式，增加了菌丝生长点，使金针菇液体菌种活性显著提升，提高了有效菌丝的含量，提升了接种后的萌发速度，缩减了金针菇液体菌种栽培时长。