本发明公开一种含有卷曲状纳米纤维的静电纺丝膜的周期循环低温制备方法及应用，所述方法包括：溶解原料，获得静电纺丝预制溶液；将所述静电纺丝溶液预冷，不同于现有静电纺丝技术设定的室温及更高的温度范围，在周期循环低温控制下利用铝箔片稳定电场，调节静电纺丝机参数，可以得到卷曲状纳米纤维，并可制备成膜；所述周期循环低温制备的纳米纤维膜经灭菌处理后用于细胞培养，能有效促进细胞粘附与诱导干细胞成骨分化；所述周期循环低温制备的卷曲状纳米纤维制备方法高效简单，制备工艺稳定性好，材料生物相容性好。