本发明公开了一种从无偿献血全血采集装置中分离外周血单个核细胞的方法，在无菌条件下使用管夹夹住两侧管壁，利用无菌剪刀剪开两侧管壁的上下端管口，两侧管壁均预留出一截长管；利用注射器将冲洗液正向冲洗滤白器和反向冲洗滤白器，收集反向冲洗得的的液体进行离心，离心后吸弃上清，用生理盐水重悬细胞后添加到另外两个装有等量的Ficoll的离心管中继续离心；离心结束后吸弃上清，吸取Ficoll上方的白膜层至新的离心管中且补加生理盐水，离心后吸弃上清，生理盐水重悬后采用血球计数板手动计数。本发明方法，能够从无偿献血采血管道的滤白器中无菌提取单个核细胞及体外培养，并把体外培养的细胞作为DC‑CIK治疗细胞。