本发明公开一种细胞外囊泡体外装载mRNA的方法，在中性条件下携带弱负电或电中性脂质体，在弱酸性条件下进行mRNA装载，将mRNA与阳离子脂质体共孵育后装载细胞外囊泡，装载后的细胞外囊泡通过超滤换液恢复到中性；抽提样品中的RNA，通过RT‑qPCR定量检测mRNA拷贝数，检测装载前后mRNA拷贝数，比值为mRNA在细胞外囊泡中的包封率。与传统方法比较，本发明提供的方法操作简单，对操作技术水平要求低、实验周期短；对于所要转载的mRNA限制少，相应的具有较广的应用范围；在中性条件下携带弱负电或电中性脂质，在弱酸性条件下进行mRNA装载，装载后的细胞外囊泡通过换液的方法恢复到中性环境，可以规避阳离子脂质体携带正电荷而存在细胞毒性的问题，能够用于制备生物制品。