本发明涉及一种由人胚胎干细胞诱导分化为NK细胞的方法，属于遗传工程技术领域；所述方法包括人胚胎干细胞的复苏与传代、诱导得到中胚层细胞、诱导得到CD34⁺造血干细胞、分离纯化CD34⁺造血干细胞、诱导得到NK细胞、扩增培养；所述人胚胎干细胞为人胚胎干细胞系H9；所述人胚胎干细胞的复苏与传代，将人胚胎干细胞复苏后进行传代，传至第2代，细胞汇合度为80%以上时，用于诱导得到中胚层细胞；本发明采用人胚胎干细胞诱导分化得到NK细胞，在效靶比为20:1时，对HELA肿瘤细胞系的杀伤率为94.25%，对LOVO肿瘤细胞系的杀伤率为91.24%。