本发明公开了一种中华鲟人工授精方法及所用稀释液。所述的方法，是采用稀释液A液和B液作授精介质，用二次湿法操作，第一次用A液淘洗卵子去除卵巢液，第二次用B液激活卵子和精子并使精子分散均匀授精；所述的稀释液，为A液和B液，A液由NaCl、KCl、CaCl₂·2H₂O、MgCl·6H₂O、NaHCO₃、Na₂CO₃、NaOH、柠檬酸、青霉素、链霉素、蒸镏水配制而成，B液由A液以25倍体积的蒸镏水稀释而成。本发明解决的问题是，避免不利自然因素对人工授精的卵、精的损坏，提高卵、精激活率、受精率、降低致畸率、节省精液用量，从而使中华鲟人工授精对野生雄鲟捕捞数量的依赖降低。