一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株及其应用
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摘要
一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株的构建方法，将含前导肽的脂肪酶基因pro‑rml插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZα+Mα上构建得到含2拷贝目的基因的表达载体pPICZα+Mα‑2prorml。将含有2拷贝的目的基因的表达载体分别转到巴斯德毕赤酵母中并筛选获得含4拷贝数目的基因的能够表达Pro‑RML的基因工程菌mα‑4pRML‑X33。一种制备米黑根毛霉脂肪酶酶粉的方法，采用过表达转录调控因子HAC1的4拷贝脂肪酶基因的毕赤酵母菌株进行发酵，酶活达到1078U/mL。将该菌株产生的发酵液用丙酮制备酶粉。当发酵液pH调整到4.0，丙酮和发酵液的体积比为2:1，40mL发酵液获得酶粉的重量为1.0116g，酶粉的比活为7936.5U/g，酶粉的回收率为37.935％。为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。
基本信息
专利标题 ：
一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株及其应用
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN110923260A
申请号 ：
CN201811092263.4
公开（公告）日 ：
2020-03-27
申请日 ：
2018-09-19
授权号 ：
CN110923260B
授权日 ：
2022-06-03
发明人 ：
黄金金黄蓉马艳郑维发
申请人 ：
江苏师范大学
申请人地址 ：
江苏省徐州市铜山区上海路101号
代理机构 ：
南京经纬专利商标代理有限公司
代理人 ：
周敏
优先权 ：
CN201811092263.4
主分类号 ：
C12N15/81
IPC分类号 ：
C12N15/81 C12N1/19 C12N9/20 C12R1/84
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体或其分离、制备或纯化；所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/63
使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节
C12N15/79
专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统
C12N15/80
用于真菌
C12N15/81
用于酵母
法律状态
2022-06-03 ：
授权
2020-04-21 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 15/81
申请日 : 20180919
申请日 : 20180919
2020-03-27 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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