本发明公开了一种负载有脂溶性维生素的桃胶多糖纳米球的制备方法。将1重量份的水溶性桃胶多糖、4~8重量份的硫辛酸和0.2~0.8重量份的对甲苯磺酸一同加入到50~100重量份的二甲基亚砜中，所得混合液在氮气氛围下于80~120℃搅拌反应5~12小时，然后用去离子水透析24小时后离心分离，收集离心得到的沉淀物；将收集的离心沉淀物和0.01~0.25重量份的脂溶性维生素一起加入到10~50重量份的有机溶剂中搅拌10分钟后，再在去离子水中透析24小时，即制得负载有脂溶性维生素的桃胶多糖纳米球。本发明具有制备过程简单、提纯分离方便、制备成本低等优点。所制备的负载有脂溶性维生素的桃胶多糖纳米球在功能性食品和化妆品领域具有良好的应用前景。