本发明涉及生物科技检测技术领域，具体公开一种无患子皂苷标准品的非标定量测定试剂盒及测定方法，该方法不需要无患子皂苷标准品，是一种非标定量的无患子皂苷含量测定方法；所述的试剂盒包括溶解剂、水解剂、指示剂、中和剂、显色剂及糖标准品，所述的测定方法包括以下步骤：A糖基含量的测定；B皂苷元含量的测定；C计算无患子皂苷样品中皂苷含量。本发明既可用于无患子皂苷标准品的建立，也可用于任何样品中无患子皂苷含量的测定。该发明针对皂苷中的糖基及皂苷元通过不同工艺分别进行提取、测定，相对于现有技术，本发明成本低、稳定性高。