本发明提供一种基于酪氨酸酶纳米胶囊的电化学传感器的制备方法及其应用，首先是酪氨酸酶的表面修饰：加入含烯基的基团，通过吸附、共价交联等方式将带烯基的小分子固定到酶分子的表面，使其成为可聚合的酶单分子；然后是原位自由基聚合：将稳定剂、单体、交联剂和引发剂加入到经表面修饰的酪氨酸酶溶液中，经原位自由基聚合，使聚合物在酶分子表面形成一薄层网状聚合物，形成酶单分子纳米胶囊；冷冻干燥得到所述酪氨酸酶纳米胶囊；最后是制备基于酪氨酸酶纳米胶囊的电化学传感器。该传感器不仅灵敏度高、检测限低、选择性高，而且稳定性高、可靠便携、成本低、制备方法简单。