合成丙酮酸与D-丙氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用

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摘要

本发明公开了一种合成丙酮酸与D‑丙氨酸的基因工程菌及其构建方法及应用。本发明的重组大肠杆菌是通过敲除Escherichia coli BL21(DE3)中的丙酮酸脱氢酶复合体aceEF基因、丙酮酸甲酸裂解酶pflB基因、丙酮酸氧化酶poxB基因、磷酸烯醇式丙酮酸合酶pps基因和乳酸脱氢酶ldhA基因，阻断丙酮酸进一步代谢的关键途径，并敲除了编码丙酮酸转运蛋白的基因btsT、cstA得到的。本发明利用L‑氨基酸脱氨酶pm1催化D,L‑丙氨酸，不仅可以将L‑丙氨酸转化为丙酮酸，同时还能拆分得到D‑丙氨酸，为D,L‑丙氨酸的手性拆分提供了新的思路和方法。通过改造获得了高效合成丙酮酸与D‑丙氨酸的重组大肠杆菌，丙酮酸产量达到32.0g/L，L‑丙氨酸的转化率达到80％，D/L‑丙氨酸的拆分率达到80％。

基本信息

专利标题：

合成丙酮酸与D-丙氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用

专利标题（英）：

暂无

公开（公告）号：

CN111100832A

申请号：

CN201911385044.X

公开（公告）日：

2020-05-05

申请日：

2019-12-28

授权号：

CN111100832B

授权日：

2022-04-19

发明人：

刘龙刘克毛馨竹曲丽莎堵国成李江华陈坚

申请人：

江南大学

申请人地址：

江苏省无锡市蠡湖大道1800号

代理机构：

苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人：

王玉仙

优先权：

CN201911385044.X

主分类号：

C12N1/21

IPC分类号：

C12N1/21 C12N15/70 C12N15/90 C12P7/40 C12P13/06 C12R1/19