本发明涉及飞机检测技术领域，尤其涉及一种航空燃油取样器以及取样方法，包括导油单元和取样主体，且导油单元与取样主体可拆卸连接；取样主体包括壳体，壳体的壳腔中设置有开门内柱；壳体上设置有旋转调节机构，旋转调节机构与开门内柱相互配合，用于顶开飞机机体放油口中的单向活门。本技术方案可自由掌控单向活门的开门时机，即，可实现在完成取样器安装后再打开飞机机体放油口中的单向活门，确保取样器与飞机机体的放油口完全密封后再控制燃油流入取样器，有效防止燃油外漏，节约燃油成本、杜绝燃油污染伤害；另外，利用开门内柱直线上升顶开机载成品，实现有效保护机载成品。