本发明公开一种高效的利拉鲁肽的纯化分离方法，涉及一种色谱技术纯化利拉鲁肽的改进方法。本方法采用高效液相反相制备色谱技术对利拉鲁肽进行分离纯化，该制备方法以反相色谱填料为基质，对纯化工艺条件中重要参数进行优化，如缓冲盐种类、浓度、pH、流动相梯度及上样量等，使样品具有适当的保留和良好的峰形；采用优化后的纯化工艺可以获得高纯度利拉鲁肽。本发明方法具有高选择性、载样量大、收率高等优势，本发明所要解决的技术问题是现有制备方法分离纯化困难、产品的总收率和纯度低。本发明为缩短生产周期、降低生产成本、提高产品质量提供了一种新的方法。