一种高温蒸汽灭菌装置，本实用新型涉及消毒杀菌领域，具体设计高温蒸汽灭菌设备。本发明由灭菌室、加热室、载物架和风冷装置组成；灭菌室通过第一禁锢装置与加热室相连，加热室的第一蒸汽出口与灭菌室第一蒸汽入口相通；载物架通过定位装置安装在灭菌室内部。本发明通过蒸汽系统与灭菌系统分离达到在不打开高温蒸汽灭菌器的门体的情况下，使样品脱离热源，进行降温过程；通过独立的灭菌系统与风冷系统相互配合，达到灭菌系统快速降温的目的。同时蒸汽管通过通入高速气流，使灭菌室内压强大于管内压强，使空气不会进入灭菌室，避免灭菌后物品再次污染；通过分流板设计在充分利用空间的同时避免冷凝下来的水蒸气滴到下一个物品上造成的交叉污染。