本发明提供一种泽泻三萜类化合物及其制备方法、结构表征方法和应用。本发明以泽泻干燥块茎为原料，经特定浓度的乙醇提取，石油醚、二氯甲烷萃取，然后以不同比例的石油醚‑乙酸乙酯对萃取得到的二氯甲烷相进行粗分，再以不同比例的甲醇‑水进行洗脱分离，最后经半制备液相色谱分离纯化，得到式Ⅰ、式Ⅱ所示的两个新型结构的泽泻单体化合物。通过本发明提供的泽泻三萜类化合物的分离纯化方法，一次性可获取多个高纯度的新型结构的三萜类化合物，为产业化开发泽泻三萜类化合物制剂提供高纯度的原料，且分离方法简单，分离效率高，具有极高的推广价值。