本发明公开了一种树苔浸膏中大分子缩酚酸类的分离提纯方法，根据树苔浸膏缩酚酸类化合物的分子结构中官能团的理化特性，选择特定分子结构的非质子性极性有机溶剂，将树苔浸膏中易溶解的小分子致香物质全部溶解萃取，同时使得缩酚酸类大分子物质在溶剂中由于溶解能力差而析出，达到树苔浸膏中小分子物质和大分子缩酚酸类物质分离完全的效果。分离得到的缩酚酸类固体，经合适的有机溶剂重结晶提纯，可得到色泽较浅且纯度较高的缩酚酸固体。本发明提供的分离方法能提升树苔浸膏的使用价值，扩展其应用领域。提纯后的缩酚酸固体呈颗粒状，具有松散、干燥、不粘稠、使用添加方便等特点，在传统卷烟和新型烟草中都具有较好的应用前景。