本发明属于干细胞培养技术领域。更具体地，涉及一种促进间充质干细胞增殖与分化的培养方法及无血清培养基。其包括以下成分：人血小板裂解液0.1～3.5％、L‑谷氨酰胺1～3mmol/L、维生素C衍生物5～30μg/mL，基础培养基补足至1L。本发明无血清培养基通过添加了香菇多糖和2‑O‑乙醚抗坏血酸，实现了仅采用较低浓度的血小板裂解液即可满足间充质干细胞在体外连续扩增培养的需求，并且能够很好的维持间充质干细胞增殖高分化的性能，大大地降低了培养成本的同时降低了临床应用的风险。