本发明提供了一种松针多糖与多酚同时分级提取工艺及应用。本发明提取工艺包括以下步骤：取湿地松针洗净晾干并粉碎过筛得到松针粉末；将所得松针粉末与石油醚均匀混合进行脱脂、脱色处理；将所得松针粉末加入水中，超声破碎提取、分离得到多糖粗提液和滤渣，将所得多糖粗提液进行4℃沉降，固液分离得所述松针多糖和滤液1；将中所得滤渣和滤液1混合，加入乙醇并超声提取，固液分离得滤液2，将所述滤液2进行浓缩纯化得到所述松针多酚。本发明具有得率高，确实可靠，操作简便，能同时得到松针多酚与多糖等特点，同时所得松针多糖和松针多酚具有较好的抗氧化和抗菌、杀菌活性，对于松针资源的研究开发具有重要的实践意义和应用价值。