本发明公开了一种亲和层析填料动态载量的测定方法其包括如下步骤：1)将样品上样到装填了待筛选的亲和层析填料的层析柱上，收集流穿液，记录上样体积；所述上样体积为紫外吸收值对应的穿透蛋白样品浓度达到样品中目标蛋白的浓度的5％～10％时上样的总体积；所述样品为蛋白溶液；2)根据样品浓度‑紫外吸收值标准曲线，根据步骤1)的上样体积，计算所述的亲和层析填料的动态载量。本发明根据亲和填料和抗体亲和吸附的性质特点，构建亲和吸附的动力学模型，能够兼顾传统的静态结合载量测定方法和目前标准的动态结合载量测定方法的优点，耗时短，成本低，准确性高。