本发明公布了一种固定化微生物小球及其制备方法与应用，通过从猪粪中筛选出一株专一性强、耗时短、去除效率高的四环素降解菌，然后将微生物固定在主要成分为羧甲基纤维素钠和聚多巴胺，然后通过交联剂进行交联作用得到的固定化小球中，利用羧甲基纤维素钠(羧甲基纤维素钠)和聚多巴胺(聚多巴胺)低廉的价格，良好的粘合性、亲水性和无毒性，以及微生物对四环素的降解能力合成新型四环素降解剂，利用此固定化微生物小球不仅提高了固定化微生物对环境中毒素的耐受能力和降解能力，还充分的固定住微生物防止随水的流动而流失导致的微生物浓度下降，减弱降解效果，增强该处理系统的稳定性和抗干扰性。