本发明公开了一种表面梳状结构高分子微球的制备方法，将聚苯乙烯/二乙烯基苯微球分散于二氯乙烷中，加入氯乙酰氯和无水三氯化铝进行反应，清洗、烘干后制得表面含有氯乙酰氯功能基团的聚合物微球；将含有氯乙酰功能基团的聚合物微球加入氢氧化钠溶液，回流，制得羟基聚合物微球；将羟基聚合物微球和去离子水混合保温，通氮除氧后加入硝酸铈铵溶液，反应后加入GMA单体，通氮搅拌反应，洗涤，制得表面接枝GMA的聚合物微球；将表面接枝GMA的聚合物微球进行氨解反应或与IDA反应制得表面梳状结构高分子微球。本发明制备的高分子微球可以提高聚合物微球的表面亲水性，降低其非特异性吸附，提高目标生物分子的吸附容量。