本发明旨在提供一种测量精度高、能够整合两个移动轴的补偿数据的点胶机定位精度测量及补偿方法。本发明包括以下步骤：S1.根据参数制定标定板，标定板包括矩形阵列设置有若干标定点的透明板件；S2.将标定板装载并固定在点胶设备的载具上，以其中一个标定点为原点建立运动坐标系，并根据若干标定点之间的中心间距设定若干移动点和移动轨迹；S3.伺服移动机构带动工业相机根据设定的移动轨迹依次移动，工业相机每次移动后均对移动点对应的标定点进行拍摄；S4.根据拍摄图像计算对应的二维偏差值，并将二维偏差值保存形成补偿文件；S5.进行点胶作业时加载补偿文件，根据点胶定位点与周围标定点的设定距离值进行偏差补偿。本发明应用于点胶定位的技术领域。