固相富集结合串联酶切标签的富集新生蛋白质的方法
实质审查的生效
摘要
本发明涉及一种固相富集结合串联酶切标签的富集新生蛋白质的方法，用AHA标记细胞后提取全蛋白；取细胞裂解液和炔基树脂通过click反应连接，用不同的缓冲液洗涤炔基树脂上非特异吸附的蛋白；用胰蛋白酶和TEV酶顺次酶切释放肽段，收集样品进行LC‑MS/MS分析；所述炔基树脂为将炔基肽段GGTENLYFQG(aPra)与醛基树脂通过还原烷基化反应连接得到的炔基树脂，所述炔基肽段中，ENLYFQG序列是TEV酶识别的序列，Q和G之间是酶切的位点，酶切后G(aPra)作为可裂解标签Tc‑tag共价键连接在AHA肽段上，用于质谱鉴定和肽段指认。本发明方法实现了新生蛋白质的高效富集，质量标签质谱兼容且帮助鉴定和指认新生蛋白质。此外，整个富集流程得到极大简化，降低了样本需要量。
基本信息
专利标题 ：
固相富集结合串联酶切标签的富集新生蛋白质的方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114371297A
申请号 ：
CN202111631965.7
公开（公告）日 ：
2022-04-19
申请日 ：
2021-12-29
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
陆豪杰包慧敏蒙佩怡
申请人 ：
复旦大学
申请人地址 ：
上海市杨浦区邯郸路220号
代理机构 ：
上海科盛知识产权代理有限公司
代理人 ：
褚明伟
优先权 ：
CN202111631965.7
主分类号 ：
G01N33/68
IPC分类号 ：
G01N33/68 C12P21/06 G01N27/62
IPC结构图谱
G
G部——物理
G01
测量；测试
G01N
借助于测定材料的化学或物理性质来测试或分析材料
G01N33/208
••涂料，例如镀层
G01N33/48
生物物质，例如血、尿；血球计数器
G01N33/483
生物物质的物理分析
G01N33/68
涉及蛋白质、肽或氨基酸的
法律状态
2022-05-06 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : G01N 33/68
申请日 : 20211229
申请日 : 20211229
2022-04-19 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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