本申请公开了一种无标记高通量的葡萄糖定量检测方法，属于纳米孔传感技术领域。本发明利用葡萄糖氧化酶对葡萄糖的催化反应，其生成的产物在酶辅助下对纳米颗粒进行刻蚀、从而引起纳米颗粒形貌发生变化，刻蚀前后的纳米颗粒在固态纳米孔中进行易位产生有差异的电信号，从而实现固态纳米孔传感器对葡萄糖浓度的检测。本发明克服了固态纳米孔传感技术中纳米孔和检测分子尺寸相近的限制，通过纳米颗粒形貌的变化实现了对葡萄糖等小分子的高灵敏检测，扩大了纳米孔领域对于葡萄糖等小分子的检测范围。