本发明公开了一种同时检测胰岛素和糖化血红蛋白的电化学检测方法，属于电化学物质含量检测领域，通过三电极传感件采集实验数据，通过循环伏安法在电极上修饰金纳米材料，通过差分伏安法确定最佳的胰岛素和糖化血红蛋白的抗体溶液浓度，通过差分伏安法检测胰岛素和糖化血红蛋白溶液，证明可获得浓度信息，确定胰岛素和糖化血红蛋白的灵敏度等参数；制备二者的混合溶液，通过差分伏安法检测混合溶液获得差分伏安曲线；提取差分伏安曲线的特征值，利用回归分析模型对实验数据解耦合，分别获得胰岛素和糖化血红蛋白溶液的浓度信息。本发明实现了双物质同时检测，具有便携性好、操作简单、成本低的优势，利于实现家庭和临床的糖尿病诊断、监控和管理。