本发明公开了一种基于三种群并行遗传算法的对抗性音频样本生成方法，包括以下步骤：A：获取原始音频样本；B：得到对应的输入样本以及主种群和两个辅助种群；C：分别计算每个个体的适应度得分；D：按照适应度得分从低到高的顺序分别在主种群和辅助种群内对所有个体进行排序；E：使用语音识别模型对主种群中已排序的所有个体依次进行分类识别；F:利用三种群并行遗传算法对主种群和辅助种群进行交差、变异及个体更新，然后返回步骤D。本发明能够通过多次迭代得到符合要求的最优解，充分解决了目标网络的不可知性以及梅尔频率倒谱系数转换引起的误差问题，具有收敛速度快，全局搜索能力强，收敛效率高的优点。