本申请涉及核苷酸制备领域，具体公开了一种5’‑尿苷酸二钠的生产工艺。5’‑尿苷酸二钠的生产工艺，包括以下步骤：将5’‑胞苷酸加入水中进行搅拌后，再加入亚硝酸钠，搅拌混匀；控制温度在40℃以下，滴加强酸，进行反应，以HPLC检测，跟踪反应进程；反应结束后加入碱性溶液，调节反应液pH至中性得到混合液；将混合液加水稀释后多次纳滤得到纳滤液；将纳滤液中加入有机溶剂中，进行重复过滤结晶，得到的滤饼用有机溶剂进行淋洗，得到湿品；将湿品加热干燥，得到5’‑尿苷酸二钠。本申请生产工艺采用纳滤手段除杂提纯所得的5’‑尿苷酸二钠具有高收率和高纯度。