本发明涉及一种纤维素内切印迹模拟酶、构建方法及其应用，属于新材料技术领域，本发明应用分子印迹技术，基于生物源交联功能单体、金属离子、硼酸基单体、可聚合离子液体，在聚苯乙烯微球表面仿生设计和构建高活性印迹模拟酶水凝胶，实现纤维素生物质的高效转化和利用。本发明的成果有助于充实模拟酶构建理论的内涵，破解天然酶所存在的难题，实现生物质高效转化和利用，推动生态环境和能源利用矛盾的解决，对于落实生态文明理念，转变产业结构，推动经济、社会和生态协调、绿色和可持续发展，均具有重要的理论和实践意义。