本发明提供了一种可用于圆二色光谱手性识别的分子衍生物、制备方法及应用。制备方法具体包括：4‑苯基吡啶和2,4‑二硝基‑1‑氯苯用乙腈和乙醇混合溶液溶解，加热，得反应前驱体N‑[2,4‑二硝基苯基]‑4‑苯基吡啶鎓盐；所诉应用包括：将所得前驱体与手性伯氨基待测物混合溶于乙醇，加热反应一段时间，反应结束后，减压蒸馏，超纯水溶解进行圆二色光谱检测。本发明的有益效果是该反应具有反应条件温和、产率高、合成步骤简单、无需添加任何催化剂、后处理简单等优点，衍生基团有明显的光谱吸收效果，可以作为发色基团，且可以发生分子间有序堆积，从而有助于光谱信号的放大。