本发明公开了一种抗菌防静电纱线及其制备方法和应用，该抗菌防静电纱线包括由内而外依次设置的芯纱、抗菌层和防静电层，抗菌层由聚乳酸/壳聚糖复合纳米纤维构成，防静电层由镀银尼龙纱构成；制备方法包括：将聚乳酸和壳聚糖混合并制成纺丝液，使芯纱在运动过程中、采用共轭静电纺丝方法将纺丝液制成聚乳酸/壳聚糖复合纳米纤维并包覆在芯纱的表面，形成抗菌层，将镀银尼龙纱以螺旋状形式卷绕在抗菌层的表面，制成中间体纱线，镀银尼龙纱的包覆角度为40°‑60°，对该中间体纱线进行通电处理，制成抗菌防静电纱线，该方法制成的抗菌防静电纱线不仅兼具优异且稳定持久的抗菌、抗静电性能，而且力学性能较好，适合连续性生产。