本发明属于益生菌促进剂的技术领域，公开了一种甜杏仁油糖蛋白酚酸纳米肠道益生菌促进剂及其制备和应用。方法：1)将甜杏仁在pH7‑9缓冲液中提取，离心，上层液为甜杏仁油，下层液用弱极性大孔树脂进行吸附；将未被吸附的溶液透析，干燥，得甜杏仁糖蛋白；将吸附后的大孔树脂用乙醇水溶液洗脱，干燥，得甜杏仁酚酸；2)将脂肪酶与甜杏仁油反应，再与甜杏仁糖蛋白继续反应，得甜杏仁油糖蛋白结合物；3)在搅拌的条件下，将甜杏仁酚酸与甜杏仁油糖蛋白结合物混合，过微孔滤膜，得甜杏仁油糖蛋白酚酸纳米肠道益生菌促进剂。本发明的促进剂抑制大肠埃希菌，促进肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的显著增殖。本发明的促进剂用于制备肠道菌群调节药物。