本发明公开了一种基于人多能干细胞构建心脏类器官的方法。本发明提供了基于人的多能干细胞构建心脏类器官的方法，包括如下步骤：1)将离体人的多能干细胞在不进行水凝胶包裹的条件下成球培养，得到人多能干细胞球；2)将所述人多能干细胞球依次进行第一次分化培养、第二次分化培养和第三次分化培养，即得到心脏类器官；本发明方法构建的心脏类器官中的心肌细胞组成比例与人心脏接近，构建的心脏类器官心肌细胞比例为34.1％，构建的心脏类器官具有类腔室结构以及分泌细胞外基质ECM；心脏类器官跳动收缩正常。