本发明公开了一种红光发射碳纳米点、其制备方法及应用，涉及碳纳米材料技术领域。通过以柠檬酸和尿素与甲酸为原料通过一步溶剂热法合成高效的红光发射碳纳米点，无需复杂的纯化程序，制备得到的碳纳米点表面有强的吸电子结构，使红光发射碳纳米点有高荧光量子效率的红色发射。制备得到的碳纳米点可以和白蛋白形成复合材料，在水溶液中具备较高的荧光量子产率，并具有明显增强的单光子下转换和多光子上转换荧光，可以在生物成像、生物医疗中得到应用。